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北京鼎國(guó)昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司一級(jí)代理品牌
正確地選擇一種功能恰當(dāng)?shù)倪^(guò)濾介質(zhì)或過(guò)濾器,不僅確保樣品前處理工藝的完善性,有利于獲得準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,更有利于加速研發(fā)過(guò)程、創(chuàng)造效益和節(jié)約成本。面對(duì)如此眾多的 過(guò)濾介質(zhì)和過(guò)濾器,如何讓實(shí)驗(yàn)者從“一開(kāi)始就是正確的"而避免人力物力的浪費(fèi)。
在某些溶液或溶劑環(huán)境下,過(guò)濾介質(zhì)與過(guò)濾器外殼的物理化學(xué)完整性不會(huì)受到破壞的能 力,即化學(xué)兼容性。當(dāng)化學(xué)兼容性不佳時(shí),過(guò)濾介質(zhì)暴露于某些化合物中則引發(fā)纖維或 顆粒脫落,或因耐溶劑性差而被溶劑溶出,或出現(xiàn)軟化、脆化、變性、溶脹等現(xiàn)象。另外, 與溶劑或溶液的接觸時(shí)間長(zhǎng)短、溫度、濃度和壓力等因素都可能影響到兼容性。
過(guò)濾介質(zhì)如果對(duì)水表現(xiàn)出親和性,理論上可被任何極性溶劑浸潤(rùn),絕大多數(shù)親水介質(zhì)也 親和極性有機(jī)溶劑,但不一定兼容。如果親水介質(zhì)不與有機(jī)溶劑和腐蝕性溶劑發(fā)生反應(yīng)(如再生纖維素膜/RC 膜),則適用于水相、有機(jī)相和腐蝕性溶液;如果親水介質(zhì)不易與有 機(jī)溶劑反應(yīng)(如尼龍膜),則同時(shí)適于水相和有機(jī)溶劑過(guò)濾。
過(guò)濾介質(zhì)如果憎水,適合過(guò)濾有機(jī)溶劑或作通風(fēng)和氣體過(guò)濾,這樣水氣不能透過(guò),通常使用 當(dāng)量孔徑為 1~5um 或更小孔徑的聚四氟乙烯濾膜(TE 或 ePTFE)過(guò)濾去除氣體中顆粒物 和水氣。
液體流速實(shí)際上受多個(gè)因素的影響,特別是被過(guò)濾的固體/液體的性質(zhì)和過(guò)濾介質(zhì)的化 學(xué)兼容性。為比較各種過(guò)濾介質(zhì)的性能,要求設(shè)定好標(biāo)準(zhǔn)化條件,那么在對(duì)過(guò)濾介質(zhì)的濾 速評(píng)價(jià)時(shí)不受顆粒物的附加影響。
它指是過(guò)濾介質(zhì)不斷被加載顆粒物而維持可觀的過(guò)濾速度和壓力差的能力??傮w上,與具有 同等顆粒截留度的纖維素濾紙相比,玻璃微纖維濾紙因纖維更加細(xì)小和比表面積更 大而表現(xiàn)出更高的負(fù)載量,而濾膜受厚度和比表面積的限值,其負(fù)載量較低一些?!岸氯麎?命"用于表征負(fù)載量。
我們都知道,相同的過(guò)濾介質(zhì)對(duì)氣體中的顆粒物的去除效率高于對(duì)液體中的顆粒物,這 與兩種條件下過(guò)濾機(jī)制不同有關(guān)。通常用對(duì)標(biāo)準(zhǔn)顆粒物的穿透率(%)或截留率(%)來(lái)表征空氣 濾器的過(guò)濾效率。美國(guó)采用 0.3μm 的鄰苯二甲酸二辛酯氣溶膠(DOP)檢測(cè)空氣過(guò)濾介質(zhì)或?yàn)V器是普遍的方法,歐洲基于鈉焰法采用 0.3-0.5μm 氯化鈉顆粒來(lái)檢測(cè)過(guò)濾效率,我國(guó)綜 合采用了油霧法和鈉焰法來(lái)表征截留效率。
關(guān)于用作過(guò)濾液體的過(guò)濾介質(zhì),一般認(rèn)為>98%的標(biāo)準(zhǔn)顆粒截留效率足以保證次級(jí)過(guò)濾的 效果。深度過(guò)濾器的顆粒截留度是通過(guò)被截留的顆粒大小(μm)來(lái)進(jìn)行衡量的,即最初加載于過(guò)濾介質(zhì)或?yàn)V器上的具有一定尺度(μm)的顆粒物被截留了 98%以上,就定義該過(guò)濾介質(zhì) 或?yàn)V器的顆粒截留度為多少微米(μm),顆粒截留度=被過(guò)濾的標(biāo)準(zhǔn)顆粒的大小。
孔徑評(píng)價(jià)對(duì)所有濾膜都有重要意義,徑跡蝕刻膜 Nuclepore、Cyclepore 和氧化鋁膜 (Anopore 或 AAO) 的孔徑大小(μm)是利用光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡觀察測(cè)量而來(lái),稱為 “真實(shí)孔徑";其他大多數(shù)的微孔濾膜的孔徑大小(μm)是通過(guò)泡點(diǎn)法(BubblePoint)來(lái)測(cè)定, 后者的孔徑具有特定的分布規(guī)律,因此稱為“當(dāng)量孔徑",即一種間接測(cè)量后換算出的孔徑。標(biāo)稱孔徑(Nominal Pore Size)有的以真實(shí)孔徑來(lái)表征,有的以當(dāng)量孔徑來(lái)表征, 由于這兩種濾膜的過(guò)濾機(jī)理差異較大,使用者必須要辨別濾膜的孔徑類(lèi)型,真實(shí)孔徑的結(jié)構(gòu) 一般是上下貫通的柱狀孔,而當(dāng)量孔徑結(jié)構(gòu)一般是三維無(wú)規(guī)則縫隙、網(wǎng)狀或?qū)盈B的形態(tài)。
微孔濾膜材質(zhì)通常是高分子聚合物制成的具有一定孔徑分布的過(guò)濾膜,它不同于深度過(guò) 濾介質(zhì)(棉纖維素和玻璃微纖維濾紙),微孔濾膜的厚度較薄,傾向于表面過(guò)濾,材質(zhì) 不局限于聚合物。微孔濾膜中的徑跡蝕刻膜和氧化鋁膜是一類(lèi)具有真實(shí)孔徑且精確分布的濾 膜,真實(shí)孔徑最大可至 12μm,最小可至 20nm 和 15nm。微孔濾膜常用于亞微米顆粒、微生 物體、病毒等收集,其中真實(shí)孔徑的表面過(guò)濾膜具有更高的回收率。
微孔濾膜根據(jù)要過(guò)濾的目標(biāo)特性不一樣,可選用不同材質(zhì)和不同規(guī)格的濾膜,大體上分為:混合纖維素膜,尼龍膜,PTFE膜,PVDF 膜,硝酸纖維素酯膜,醋酸纖維素酯膜,玻璃纖維 膜,聚醚砜膜,聚丙烯膜,聚碳酸酯膜和無(wú)機(jī)膜。
對(duì)于大多數(shù)應(yīng)用,在室溫下過(guò)濾溶液沒(méi)有問(wèn)題。通常增加溶液的溫度會(huì)增加流速。例如,將 細(xì)胞培養(yǎng)基的溫度從 4℃增加至 37℃會(huì)使流速加倍。這最可能是由于培養(yǎng)基粘度的下降。但 是,在一些情況下,較低溫度下過(guò)濾會(huì)增加總通量,對(duì)血清等含蛋白質(zhì)和脂肪的溶液尤其如 此。
對(duì)于真空過(guò)濾,建議采用 400mm Hg(7.73 psig)的壓差(真空)。再增加壓差只會(huì)使流速提 高一點(diǎn),但是可能導(dǎo)致過(guò)量泡沫的形成,因?yàn)闉V出液中的氣體會(huì)從溶液中逸出產(chǎn)生氣泡。在 過(guò)濾加入碳酸氫鹽緩沖液的細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)這個(gè)問(wèn)題尤其突出。在較高的壓差下,培養(yǎng)基中溶 解的二氧化碳將很快逸出,導(dǎo)致 pH 值上升,如果培養(yǎng)基中含有血清蛋白則形成過(guò)量的泡沫。